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液体深层发酵
【概要描述】分批发酵。 营养物和菌种一次加入进行培养,直到结束放出,中间除了空气进入和尾气排出,与外部没有物料交换。 特点:一次性;发酵过程中,营养不断减少,微生物不断增殖,环境非稳态;微生物生长的四个时期明显。 应用:广泛。
液体深层发酵
一、液体深层发酵的操作方式。 根据操作方式的不同,液体深层发酵主要有分批发酵、连续发酵和补料分批发酵三种类型。
1、分批发酵。 营养物和菌种一次加入进行培养,直到结束放出,中间除了空气进入和尾气排出,与外部没有物料交换。 特点:一次性;发酵过程中,营养不断减少,微生物不断增殖,环境非稳态;微生物生长的四个时期明显。 应用:广泛。
2、连续发酵。 连续发酵是指以一定的速度向发酵罐内添加新鲜培养基,同时以相同的速度流出培养液,从而使发酵罐内的液量维持恒定,微生物在稳定状态下生长。稳定状态可以有效地延长分批培养中的对数期。 特点:培养基等量流入流出;各种变化=0;微生物群体生长的四个时期不存在。 应用:常用于废水处理、葡萄糖酸、酒精、氨基酸发酵等工业中。 优点:操作稳定;利于机械、自动化;提高设备的利用率;减少灭菌次数;易于过程优化。 缺点:易染菌;微生物易变异;对产品类型的适应性不广;对设备及附件要求高。
3、补料分批发酵。 补料分批发酵又称半连续发酵,是介于分批发酵和连续发酵之间的一种发酵技术,是指在微生物分批发酵中,以某种方式向培养系统补加一定物料的培养技术。通过向培养系统中补充物料,可以使培养液中的营养物浓度较长时间地保持在一定范围内,既保证微生物的生长需要,又不造成不利影响,从而达到提高产率的目的。 特点:可以解除底物抑制、产物抑制、分解阻遏或克服微生物过度生长;提高有用产物的转化率; 应用:应用广泛,用于面包酵母、氨基酸、抗生素等工业;
二、发酵工艺控制。 发酵过程中,为了能对生产过程进行必要的控制,需要对有关工艺参数进行定期取样测定或进行连续测量。反映发酵过程变化的参数可以分为两类:
(1)直接参数:可以直接采用特定的传感器检测的参数。它们包括反映物理环境和化学环境变化的参数,如温度、压力、搅拌功率、转速、泡沫、发酵液粘度、浊度、pH、离子浓度、溶解氧、基质浓度等。
(2)间接参数:至今尚难于用传感器来检测的参数,包括细胞生长速率、产物合成速率和呼吸嫡等。这些参数需要根据一些直接参数,借助于电脑计算和特定的数学模型才能得到。 上述参数中,对发酵过程影响较大的有温度、pH、溶解氧浓度等。
1、温度:温度能影响酶的活性,也能影响生物合成的途径。温度还会影响发酵液的物理性质,以及菌种对营养物质的分解吸收等。应采用具备热交换装置发酵罐。
2、pH:pH能够影响酶的活性,以及细胞膜的带 电荷状况。还会影响培养基中营养物 质的分解等。常用的控制方法有:①调整生理碱性和酸性盐类的比例;②选择不同C、N的种类和比例;③添加缓冲剂。
3、溶解氧:在发酵过程中菌种只能利用溶解氧。因此,必须向发酵液中连续补充大量的氧,并要不断地进行搅拌,以提高氧在发酵液中的溶解度。
4、泡沫:发酵过程中,通气、搅拌、微生物的代谢过程及培养基中某些成分的分解等,都有可能产生泡沫。过多的持久性泡沫对发酵是不利的。常采用机械消泡和消泡剂消沫。
5、营养物质的浓度:发酵液中各种营养物质的浓度,特别是碳氮比、无机盐和维生素的浓度,会直接影响菌体的生长和代谢产物的积累。
三、发酵设备。 进行微生物深层培养的设备统称发酵罐。由于微生物有好氧与厌氧之分,所以其培养装置也相应地分为好氧发酵设备与厌氧发酵设备。
(1)液态好氧发酵罐。 特点:有冷却装置。 有通风装置。 代表:机械搅拌发酵罐、通气搅拌发酵罐。
(2)液态厌氧发酵罐。 特点:有冷却装置。 没有通风装置。 代表:酒精发酵罐、啤酒发酵罐。 1、机械搅拌式发酵罐。 它是利用机械搅拌器的作用,使空气和发酵液充分混合,促进氧的溶解,以保证供给微生物生长繁殖和代谢所需的溶解氧。 类型:通用式发酵罐、自吸式发酵罐。 2、通风搅拌式发酵罐。 在通风搅拌式发酵罐中,通风的目的不仅是供给微生物所需要的氧,同时还利用通入发酵罐的空气,代替搅拌器使发酵液均匀混合。类型:循环式通风发酵罐(空气带升式发酵罐或带升式发酵罐)、高位塔式发酵罐。 3、厌氧发酵设备。 特点:严格的厌氧液体深层发酵的主要特色是排除发酵罐中的氧。 类型:酒精发酵罐和用于啤酒生产的锥底立式发酵罐。
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